O que é o teste de endotoxinas e quando é necessário o controle de pirogênios?

Além da Biofarmacêutica | Perguntas Frequentes sobre Gelatina Farmacêutica

Resposta curta:O teste de endotoxinas mede a endotoxina bacteriana, um tipo de pirógeno que pode causar febre se entrar na corrente sanguínea, geralmente com o teste de lisado de amebócitos de Limulus (LAL) ou um método atual comparável. O controle de pirógenos é exigido apenas em contextos específicos, principalmente quando a gelatina ou um material derivado da gelatina se destina a injetáveis, vacinas, produtos biológicos ou outras aplicações estéreis; a gelatina para cápsulas e comprimidos orais convencionais normalmente não é controlada quanto à endotoxina, e o requisito aplicável é sempre definido pelo produto final e pela legislação vigente.

Pirógenos e endotoxinas: a diferença fundamental

Um pirógeno é qualquer substância que pode causar febre ao entrar em contato com a corrente sanguínea. A endotoxina bacteriana, um componente da membrana externa de bactérias Gram-negativas, é o pirógeno mais comum e mais estudado, sendo geralmente o alvo dos testes farmacêuticos. As endotoxinas são termoestáveis, podendo sobreviver a processos que matam as próprias bactérias. Por isso, materiais destinados a vias de administração estéreis ou parenterais devem ser testados, em vez de serem considerados isentos de substâncias.

Por que a exigência depende da via de administração?

O corpo humano tolera a endotoxina de forma muito diferente dependendo da via de administração. O trato digestivo é rotineiramente exposto à endotoxina e normalmente a metaboliza, razão pela qual as formas farmacêuticas orais, como cápsulas e comprimidos, geralmente não necessitam de controle de pirogênios ou endotoxinas. A endotoxina torna-se um atributo crítico de qualidade apenas quando um material ou seu extrato pode atingir a corrente sanguínea, os tecidos ou outros locais normalmente estéreis, como em produtos injetáveis, formulações parenterais, vacinas ou estabilização biológica e certas aplicações em tratamento de feridas ou em contato com tecidos.

Quando o controle de pirogênios ou endotoxinas se aplica à gelatina.

• Formas farmacêuticas injetáveis ​​ou parenterais- Se a gelatina estiver presente em uma formulação injetável, o excipiente deve, normalmente, atender a um requisito de endotoxina estabelecido para esse produto.
• Vacinas e produtos biológicos- A gelatina utilizada como estabilizante em produtos administrados por injeção é controlada em relação às especificações do produto final.
• Aplicações estéreis e médicas- Certos usos que envolvem contato com tecidos, implantes ou dispositivos podem exigir materiais com baixo teor de endotoxinas.
• Graus especiais não gelificantesGelatinas hidrolisadas ou não gelificantes para cultura de células ou usos semelhantes são, por vezes, fornecidas com baixo teor de endotoxinas, mas apenas quando a aplicação o exige.

A gelatina farmacêutica convencional para cápsulas, comprimidos e outras formas farmacêuticas sólidas de administração oral normalmente não está sujeita a limites de endotoxinas, pois o produto final não apresenta tal exigência.

Métodos de teste comumente usados

Quando um teste de endotoxina é necessário, a escolha do método segue a farmacopeia vigente e a bula do produto. A abordagem mais conhecida é o teste de lisado de amebócitos de Limulus (LAL), que utiliza um lisado de células sanguíneas do caranguejo-ferradura e reage à endotoxina com uma resposta mensurável de coagulação ou coloração. Os ensaios de fator C recombinante e o teste de ativação de monócitos (MAT) são opções mais recentes, e o teste de pirogênio em coelhos mede a resposta febril diretamente, em vez de apenas a endotoxina. Os resultados são normalmente expressos em unidades de endotoxina, por exemplo, por grama ou por miligrama de material, de acordo com a especificação acordada.

O que procurar em um Certificado de Autenticidade (COA).

Se o seu produto realmente necessita de gelatina com baixo teor de endotoxinas, solicite ao fornecedor uma qualidade que seja comprovadamente de baixo teor de endotoxinas e verifique se o certificado de análise apresenta o resultado da endotoxina, juntamente com o método e o limite de referência para o teste. Se o seu produto for uma cápsula ou comprimido oral, não presuma que um certificado de grau alimentício ou para cápsulas necessite de uma linha de endotoxinas; inversamente, não presuma que um grau para cápsulas seja adequado para uso injetável. Em caso de dúvida, confirme a exigência com sua equipe de assuntos regulatórios ou de qualidade antes de especificar a qualidade.

Leituras relacionadas

Para uma visão mais ampla, vejaComo ler uma especificação de gelatina farmacêutica (COA)eQuais são os limites microbianos aplicáveis ​​à gelatina farmacêutica?.